實(shí)驗(yàn)流程?

1. ?樣本準(zhǔn)備?

• 新鮮組織速凍：-25℃冷凍箱速凍3-5分鐘，切8μm厚度切片
  。

• 直接固定：切片經(jīng)4%多聚甲醛或95%乙醇固定10分鐘，蒸餾水沖洗
  。

2. ?染色步驟?

• ?焦油紫/硫堇染色?：浸入1%焦油紫或硫堇染液10分鐘至1小時(shí)（根據(jù)組織類型調(diào)整）
  。

• ?分色?：70%酒精分化數(shù)秒至數(shù)分鐘，顯微鏡下控制至背景透明、Nissl小體清晰
  。

3. ?脫水封片?

• 梯度酒精脫水（70%→80%→95%→無(wú)水乙醇），二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固
  。

?關(guān)鍵注意事項(xiàng)?

• ?染色控制?：分色是核心步驟，需顯微鏡下實(shí)時(shí)觀察避免過(guò)度脫色
  。

• ?結(jié)果判讀?：

• ?陽(yáng)性信號(hào)?：Nissl小體呈深紫色（神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)顆粒狀結(jié)構(gòu)）。

• ?背景?：應(yīng)為無(wú)色或淺灰色，否則需延長(zhǎng)分色時(shí)間
  。

?與石蠟切片對(duì)比?

• ?優(yōu)勢(shì)?：冰凍切片保留更多脂溶性成分，適合快速檢測(cè)
  。

• ?局限性?：組織形態(tài)略腫脹，需經(jīng)驗(yàn)判讀
  。

如需長(zhǎng)期保存，建議轉(zhuǎn)換為石蠟切片（需避免解凍后固定）