小鼠膽結(jié)石模型實(shí)驗(yàn)方案

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇

• ?品系?：推薦SPF級(jí)C57BL/6小鼠（雌性，體重20±2g）

• ?分組設(shè)計(jì)?：

• 空白對(duì)照組（普通飼料）

• 模型組（致石飼料）

• 陽(yáng)性藥物對(duì)照組

• 受試藥物低/中/高劑量組（每組15只）

二、造模方法

1. ?致石飼料配方?

• 15%脂肪 + 2%cholesterol + 1%膽酸

• 或高脂飼料聯(lián)合膽囊收縮素（CCK）刺激

2. ?飼養(yǎng)周期?

• 適應(yīng)性喂養(yǎng)1周（普通飼料）

• 致石飼料連續(xù)喂養(yǎng)4-8周

3. ?環(huán)境控制?

• SPF級(jí)動(dòng)物房，溫度22±1℃，12小時(shí)光暗循環(huán)

三、模型評(píng)估指標(biāo)

1. ?生理觀察?

• 每周記錄體重、進(jìn)食量、皮毛狀態(tài)及活動(dòng)情況

2. ?生化檢測(cè)?

• ?血清/膽汁分析?：cholesterol、膽汁酸水平（ELISA/HPLC）

• ?炎癥因子?：IL-6、TNF-α等（試劑盒檢測(cè)）

3. ?病理學(xué)檢查?

• 膽囊組織HE染色觀察結(jié)石形成及炎癥浸潤(rùn)

• 結(jié)石成分化學(xué)分析（需手術(shù)取石）

四、注意事項(xiàng)

• ?質(zhì)量控制?：模型組結(jié)石形成率需＞80%

• ?替代方案?：基因修飾小鼠（如ACAT2敲除）可增強(qiáng)抗結(jié)石特性

• ?聯(lián)合造模?：膽結(jié)石模型可同步誘導(dǎo)膽囊炎，用于病理機(jī)制研究

五、應(yīng)用方向

• ?藥物篩選?：如capsaicin通過調(diào)節(jié)CYP7A1表達(dá)抑制結(jié)石形成

• ?機(jī)制研究?：cholesterol代謝異常與轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（如SCP2、BSEP）的關(guān)聯(lián)